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與DNA凝膠電泳一樣，蛋白質(zhì)凝膠電泳也是實(shí)驗(yàn)室中稀松平常的工作。無(wú)論是Westernblot還是質(zhì)譜分析，都離不開蛋白電泳。研究人員通過(guò)大?。?D）和電荷（2D）來(lái)分辨蛋白質(zhì)。當(dāng)然，僅僅分離蛋白是不夠的，它們必須要經(jīng)過(guò)染色。染料的選擇有很多，具體選哪種，這取決于靈敏度要求、現(xiàn)有的設(shè)備和下游的應(yīng)用。常規(guī)之選研究人員主要使用三種染料來(lái)處理日常的蛋白凝膠：考馬斯藍(lán)、銀染和熒光。據(jù)Sigma-Aldrich公司蛋白技術(shù)的研發(fā)JeffreyTurner介紹，染料的選擇基本上可以歸結(jié)為“...

Westernblot一直是個(gè)很費(fèi)時(shí)間的體力活。從跑膠、轉(zhuǎn)印到抗體孵育，每一步都要配制各種緩沖液，外加花費(fèi)大量的時(shí)間。若想當(dāng)天知道結(jié)果，必須起早摸黑，忙碌一天。如今，各種新產(chǎn)品的出現(xiàn)，讓我們能夠更快地獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果。這些新產(chǎn)品包括預(yù)制膠以及快速轉(zhuǎn)印儀。在這個(gè)夏天，賽默飛世爾科技又推出一款快速轉(zhuǎn)印儀PierceG2FastBlotter。傳統(tǒng)免疫印跡技術(shù)通常需要一小時(shí)甚至轉(zhuǎn)印才能保證有效的蛋白轉(zhuǎn)移。而與ThermoScientificPierce1-StepTransferBuf...

即使蛋白酶對(duì)細(xì)胞功能很重要，但你也有不想見到它們的時(shí)候。比如，在純化蛋白質(zhì)的時(shí)候，你可不想讓蛋白酶大肆吞噬你的目標(biāo)蛋白吧，特別是低豐度蛋白。如今，市場(chǎng)上有多種蛋白酶抑制劑可供選擇，幫助你在必要時(shí)停止蛋白酶的活性。為了對(duì)付細(xì)胞和組織樣品中存在的各種蛋白酶，抑制劑的選擇也在不斷增加。目前，主要有四種類型的蛋白酶，根據(jù)他們活性位點(diǎn)中的氨基酸命名：絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶。蛋白酶抑制劑可以特異針對(duì)一種蛋白酶，也可以是廣譜的。人們通常根據(jù)抑制劑作用的蛋白...

在轉(zhuǎn)基因和敲除研究中，維持多能性對(duì)利用小鼠胚胎干(ES)細(xì)胞至關(guān)重要。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多因子可以影響ES細(xì)胞的多能性,其中之一就表現(xiàn)在白血病抑制因子（LIF）對(duì)ES細(xì)胞培養(yǎng)的影響。關(guān)于抑瘤素M（OSM）能補(bǔ)償LIF在ES細(xì)胞培養(yǎng)中的作用，對(duì)此存在不一致的報(bào)道。一些研究提示在維持ES細(xì)胞多能性方面，OSM不如LIF有效。然而，其他研究發(fā)現(xiàn)它們是等效的。在本研究中，我們證明在維持ES細(xì)胞多能性上，人OSM擁有與小鼠LIF相類似的功效，包括長(zhǎng)期（超過(guò)10天）維持多能性、體外分化的能力、活...

海灣戰(zhàn)爭(zhēng)期間，美于保護(hù)*陸戰(zhàn)隊(duì)避免患上炭疽病的一款設(shè)備，如今被一位倫敦科學(xué)家別出心裁地應(yīng)用于預(yù)防加拿大男性患上侵襲性前列腺癌。這款設(shè)備鑒定結(jié)果度高、速度快。只需一滴血，三四分鐘后，研究人員便可判斷樣本患上的是生長(zhǎng)緩慢的典型性前列腺癌，還是必須得到積極治療的惡性前列腺癌。倫敦勞森健康研究所（LawsonHealthResearchInstitute）的科學(xué)家，HonLeong博士談到這款儀器時(shí)說(shuō)，“這很可能是一款檢測(cè)前列腺癌的理想儀器。”在加拿大的薩斯喀徹溫?。⊿askatch...

RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀技術(shù)又稱為RIP（RNAimmunoprecipitation），可以說(shuō)是RNA版的ChIP（染色質(zhì)免疫沉淀），該技術(shù)能幫助人們分析與RNA結(jié)合蛋白相關(guān)的核酸。在RIP試劑盒（如Sigma的Imprint®RNAImmunoprecipitationkit）的幫助下，研究者們能夠利用針對(duì)RNA結(jié)合蛋白的抗體，從細(xì)胞提取物中捕獲與蛋白相結(jié)合的RNA，再通過(guò)qPCR、芯片或二代測(cè)序技術(shù)對(duì)這些RNA進(jìn)行鑒定。不論是細(xì)胞質(zhì)還是細(xì)胞核，都會(huì)發(fā)生RNA與蛋白...

在基因組測(cè)序中，PCR擴(kuò)增似乎是繞不過(guò)去的一步。然而，PCR也帶來(lái)一些問題，包括不均勻擴(kuò)增，導(dǎo)致某些序列的比例過(guò)高。對(duì)目前的新一代測(cè)序（NGS）平臺(tái)而言，測(cè)序某些堿基組成上存在嚴(yán)重偏向的基因組區(qū)域仍是一大挑戰(zhàn)。在GEN雜志上，PatriciaFitzpatrickDimond博士介紹了PCR-Free的基因組測(cè)序。文庫(kù)制備的變革2009年，Sanger研究院的IwankaKozarewa博士及其同事介紹了一種無(wú)需擴(kuò)增的Illumina文庫(kù)制備方法（NatureMethods2...

生物通報(bào)道：在使用殺傷性武器的時(shí)候，不傷及無(wú)辜很重要，對(duì)于RNA干涉（RNAi）來(lái)說(shuō)也是如此。RNAi是一種常用的基因失活工具，它的主要缺陷在于會(huì)引起序列特異性的脫靶效應(yīng)。這樣的脫靶效應(yīng)很難預(yù)測(cè)，因?yàn)閟iRNA能夠影響與它部分互補(bǔ)的序列，像miRNA那樣抑制基因的表達(dá)。要減少脫靶效應(yīng)，可以將針對(duì)同一mRNA的不同siRNA混合起來(lái)使用。這些siRNA作用于同一個(gè)目標(biāo)，每種siRNA的濃度得以降低，稀釋了各自的脫靶效應(yīng)。然而，這一策略在實(shí)際操作中面臨著兩個(gè)問題。其一，目前“Sm...

環(huán)狀RNA（CircularRNA,CircRNA），是一種廣泛存在于生物體內(nèi)的特殊RNA分子，與線性RNA相比，穩(wěn)定性高，現(xiàn)已證實(shí)CircRNA廣泛存在于生物體內(nèi)，與線性RNA相比，穩(wěn)定性高，對(duì)microRNA具有重要調(diào)控作用。CircRNA于2012年被科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，2013年Nature雜志報(bào)道兩篇關(guān)于CircRNA的研究成果，由此關(guān)于CircRNA的研究開始引起科學(xué)家的重視。利用高通量測(cè)序技術(shù)可鑒定CircRNA在生物樣本中的種類、表達(dá)豐度及結(jié)構(gòu)，對(duì)CircRNA的研究...

在基因組測(cè)序中，PCR擴(kuò)增似乎是繞不過(guò)去的一步。然而，PCR也帶來(lái)一些問題，包括不均勻擴(kuò)增，導(dǎo)致某些序列的比例過(guò)高。對(duì)目前的新一代測(cè)序（NGS）平臺(tái)而言，測(cè)序某些堿基組成上存在嚴(yán)重偏向的基因組區(qū)域仍是一大挑戰(zhàn)。在GEN雜志上，PatriciaFitzpatrickDimond博士介紹了PCR-Free的基因組測(cè)序。文庫(kù)制備的變革2009年，Sanger研究院的IwankaKozarewa博士及其同事介紹了一種無(wú)需擴(kuò)增的Illumina文庫(kù)制備方法（NatureMethods2...