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一、實驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)克隆工作中zui常用的雙酶切；2、學(xué)習(xí)將外源基因與質(zhì)粒連接方法及操作技術(shù)；3、學(xué)習(xí)氯化鈣法制備大腸桿菌(Escherichiacoli)感受態(tài)細(xì)胞的技術(shù)；4、了解細(xì)胞轉(zhuǎn)化的概念及其在分子生物學(xué)研究中的意義。5、外源質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)入受體菌細(xì)胞的技術(shù)以及篩選轉(zhuǎn)化體的技術(shù)。6、學(xué)習(xí)鑒定重組子的方法。二、實驗原理重組子的建立：采用雙酶切質(zhì)粒載體pBR322和pUC18，酶切后產(chǎn)生了互補的粘性末端，在T4DNA連接酶的作用下，兩個質(zhì)粒片段連接。感受態(tài)細(xì)胞(Compet...

信帆生物分享：ELISA技術(shù)測定單克隆抗體效價方法一、實驗?zāi)康?.深入了解elisa法測定抗體效價的原理。2.掌握ELISA法測定單克隆抗體效價的方法。二、實驗原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。免疫酶技術(shù)是將酶標(biāo)記在抗體/抗原分子上，形成酶標(biāo)抗體/酶標(biāo)抗原，稱為酶結(jié)合物。該酶結(jié)合物的酶在免疫反應(yīng)后，作用于底物使之呈色，根據(jù)顏色的有無和深淺，定位或定量抗原/抗體。ELISA法是免疫酶技術(shù)的一種，...

ELISA實驗代測：如何正確的進行ELISA測定操作一、研究標(biāo)本的收集和保存用于ELISA測定的研究標(biāo)本zui為常用的是血清（漿），有時因為特定的檢測目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。目前研究上使用血清標(biāo)本測定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標(biāo)本的收集，要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4～6點之間，會有一峰值出現(xiàn)：生長激素、促黃體激素（LH）和促卵...

信帆生物：科學(xué)家研制出可夜視人工眼受夜行性魚類象鼻魚特殊視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)的啟發(fā)，研究人員新近研制出一種具有夜視功能的人工眼。這種技術(shù)將來有望在搜救機器人、內(nèi)窺鏡與太空探索等領(lǐng)域發(fā)揮作用。為了在低光或黑暗環(huán)境中拍攝到更清晰的照片，現(xiàn)有多數(shù)成像系統(tǒng)主要通過使用更好的感光材料或圖像增強器來提高成像器件的光敏度。美國威斯康星大學(xué)麥迪遜分校江洪睿教授團隊在新一期美國《國家科學(xué)院學(xué)報》上報告了一種光學(xué)解決方案，即讓成像器件收集更多的光線。江洪睿對新華社記者說：“我們這個方法有一個很大的優(yōu)勢，就...

信帆生物分享：美國德克薩斯大學(xué)學(xué)者揭示免疫學(xué)新研究2016年3月15日，學(xué)術(shù)期刊《美國國家科學(xué)院院刊》雜志在線發(fā)表了美國德克薩斯大學(xué)西南醫(yī)學(xué)中心的研究人員BethLevine發(fā)表的一篇研究論文，研究中指出研究人員鑒定了一個先天免疫新通路，可以幫助哺乳動物抵御病毒的致癌作用。博士研究生XiaonanDong為論文*作者，BethLevine教授為論文通訊作者。與病毒有關(guān)的癌癥其實是相當(dāng)普遍的，超過20%的人類癌癥與慢性病毒感染有關(guān)。自噬是一個相當(dāng)保守的過程，細(xì)胞通過自噬清除受損...

信帆生物分享：WB實驗常見的問題指南1.參考書推薦A.對初學(xué)者看什么資料比較好?解答：《抗體技術(shù)實驗指南》和Antibodies(alaboratorymanual，wrotebyEdHarlow，davidlane)兩本書不錯。2.針對樣品的常見問題B.做線粒體膜UCP2蛋白的WesternBlot(以下簡寫成WesternBlot)，提取線粒體后凍存(未加蛋白酶抑制劑)，用的博士德的一抗，開始還有點痕跡，現(xiàn)在越來越差，上樣量已加到120μg，換了個santacloz的一抗...

信帆生物：分光光度計維護方法說明分光光度計是實驗室檢測核酸或者蛋白樣品濃度zui常用的工具之一。儀器使用頻繁，但甚少見到有人維護。其實，保持分光光度計清潔、無污染是成功操作的關(guān)鍵。JessicaGeisler博士是eppendorf北美地區(qū)負(fù)責(zé)PCR、檢測和細(xì)胞技術(shù)的產(chǎn)品。她為我們介紹了一些儀器維護的經(jīng)驗。清潔儀器我們應(yīng)該用蘸有中性清潔劑的軟布擦拭分光光度計的表面。刺激性的清潔劑可能會損壞儀器表面。你也可以清潔比色皿本身。比色皿插槽只能用蘸有乙醇或異丙醇的無絨棉簽來清潔。這可...

ELISA實驗代測：ELISA免疫標(biāo)記技術(shù)實驗原理免疫標(biāo)記技術(shù)是將一些既易測定又具有高度敏感性的物質(zhì)標(biāo)記到特異性抗原或抗體分子上，通過這些標(biāo)記物的增強放大效應(yīng)來顯示反應(yīng)系統(tǒng)中抗原或抗體的性質(zhì)與含量。常用的標(biāo)記物包括熒光素、酶和放射性核素等，用這3種標(biāo)記物進行標(biāo)記的免疫檢測技術(shù)被稱為3大免疫標(biāo)記技術(shù)。目前，使用的免疫標(biāo)記物還有化學(xué)發(fā)光物質(zhì)、鐵蛋白和膠體金等。1.原理辣根過氧化物酶(HorserADIshPeroxidase,HRP)辣根過氧化物酶(horseradishpero...

ELISA實驗：在ELISA實驗技術(shù)中的抗原抗體反應(yīng)1.抗體的結(jié)構(gòu)抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個輕鏈(L)和兩個重鏈(H)的單體組成。Ig的輕鏈?zhǔn)窍嗤模笑?kappa)和λ(Lambda)兩種型別。五類Ig的重鏈結(jié)構(gòu)不同，這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ(gamma)鏈和μ(mu)鏈。重鏈和輕鏈的...

上海信帆：運動可以預(yù)防心臟病是真的美國心臟病協(xié)會《循環(huán)》雜志發(fā)表文章說，人到了65歲以后，如果能夠保持或者加強身體活動，能提高心臟的性能，降低得心臟病的風(fēng)險。研究人員在過去五年的心臟監(jiān)測記錄里發(fā)現(xiàn)，那些走得多而快的人愿意花費更多的時間鍛煉身體，他們的心臟跳動得更有規(guī)律，心臟的心率變異性比那些活動少的人更大。心率變異性是指每天每次心臟搏動的間隔時間的差異性。心率變異性（HRV）是反映自主神經(jīng)系統(tǒng)活性和定量評估心臟交感神經(jīng)與迷走神經(jīng)張力及其平衡性，從而判斷其對心血管疾病的病情及預(yù)...