鬼筆環(huán)肽染色

服務(wù)介紹：

鬼筆環(huán)肽(phalloidin)可特異性與細(xì)胞內(nèi)聚合微絲中的絲狀肌動(dòng)蛋F-actin結(jié)合，通過(guò)藕聯(lián)的熒光素分子，從而顯示微絲骨架在細(xì)胞中的分布。與抗體相比，鬼筆環(huán)肽無(wú)物種限制，染色特異性極-強(qiáng)，染色區(qū)和未染色區(qū)對(duì)比性非常清晰，而且標(biāo)記后的肌動(dòng)蛋白許多生理特性都得以維持。也適用于甲醛固定和去垢劑通透處理后的組織或細(xì)胞樣本。

實(shí)驗(yàn)流程：

1.細(xì)胞固定并破膜：培養(yǎng)好的細(xì)胞爬片倒去培養(yǎng)基，用PBS洗。4%多聚甲醛固定30min，PBS洗3次，每次5min，滴加0.1%TRITON，破膜20min.

2.加鬼筆環(huán)肽：爬片稍甩干后用組化筆在蓋玻片中間細(xì)胞分布均勻的位置畫(huà)圈（防止液體流走），加50-100μl鬼筆環(huán)肽工作液，室溫孵育2h，PBS洗3次，每次5 min。

3.DAPI復(fù)染細(xì)胞核：爬片用PBS（PH7.4）洗滌3次，每次5min。去除PBS后在圈內(nèi)滴加DAPI染液，避光室溫孵育10min

送樣運(yùn)輸要求：

按細(xì)胞準(zhǔn)備流程PFA固定細(xì)胞15min后用無(wú)菌PBS洗滌后用無(wú)菌PBS浸泡，離心管封口膜封好，4℃冰袋保存運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室